Techniques de biologie moléculaire

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Principales techniques utilisées couramment en biologie moléculaire :


Sommaire

[] Électrophorèse

  • Électrophorèse sur gel : cette technique permet de séparer des molécules en fonction de leur taille (appelée poids moléculaire) en les faisant migrer à travers un gel par application d'un champ électrique. Cette technique peut être utilisée pour séparer de l'ADN, de l'ARN (gels d'agarose ou d'acrylamide) ou des protéines (gel d'acrylamide)
  • DGGE : Denaturing Gradient Gel Electrophoresis
  • Électrophorèse capillaire : Variante d'électrophorèse utilisée pour le séquençage de l'ADN.

[] Manipulation d'ADN et d'ARN

[] Extraction

  • Digestion enzymatique (restriction digest) : technique utilisant des enzymes de restriction pour couper spécifiquement une molécule d'ADN afin de la manipuler ou de la cloner.

En fonction de la quantité d'ADN souhaité des midipréparations ou des maxipréparations sont également utilisées.

  • Clonage : technique qui consiste à isoler un fragment d'ADN et à le multiplier à l'identique en l'« insérant » dans une molécule d'ADN « porteuse » appelée vecteur permettant son amplification.

[] Amplification

  • PCR : (Polymerase chain Reaction) cette technique est utilisée pour amplifier de l'ADN, c'est à dire obtenir une grande quantité de copies d'une séquence nucléotidique donnée.
  • RT-PCR : technique dérivée de la PCR et permettant de cloner un gène ou de quantifier son taux de transcription (quantité d'ARN présente).
  • RAPD : technique d'amplification aléatoire permettant de comparer des ADN génomiques.

[] Séquençage

[] Quantification

[] Autres

[] Manipulation de protéines


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